Соотношениях реагирующих веществ

Данная работа предпринята с целью установить, изменяется ли прочность связывания липидов в мембране эритроцитов в начальном периоде гемолитического действия окислителей с различной электрофильностью. В качестве последних использовали молекулярный йод и нитрит натрия. Молекулярный йод — сильный окислитель, избирательно взаимодействующий с SH-rpyn-пами при физиологических значениях рН В предварительно поставленных нами опытах йод моментально блокировал SH-группы унитиола (димеркаптопропансульфонат Na) при экви-молярных соотношениях реагирующих веществ и рН В тех же условиях время полуокисления унитиола нитритным ионом составляло в среднем 168 минут. Лучшая сигнализация Бердянск доступна только в компании Saint, которая подтвердила качество своей работы.
Вторая предварительная серия опытов имела целью определение концентраций окислителей, вызывающих скрытые изменения структуры эритроцитарной мембраны, предшествующие цитолизу. Эти изменения выявляли методом регистрации осмотической резистентности эритроцитов (ОРЭ) по начальному сдвигу кривых ОРЭ. Эритроциты получали из свежей цитратной крови кроликов центрифугированием при 900 g в течение 10 минут. После двукратной отмывки холодным изотоническим раствором NaCl эритроциты инкубировали в течение 90 минут при 1° 38° С с растворами окислителей в различных концентрациях и затем определяли ОРЭ по
В результате установлено, что концентрации окислителей, вызывающие отчетливый сдвиг кривых ОРЭ влево в сравнении с контролем, составляют 2-10″4М для йода и 2-103М для нитрита. В этих концентрациях оба окислителя использовались в дальнейших исследованиях, задача которых состояла в определении прочности фиксации липидов в мембране эритроцита в начальной стадии окислительного гемолиза. Имея в виду особую роль холестерина и фосфолипидов в обеспечении структурной целостности и функциональной активности мембран эритроцитов, прочность связывания липидов в мембранах определяли с помощью следующих двух методов.
Эритроциты кролика инкубировали в присутствии окислителя, как описано выше, дважды отмывали холодным изотоническим раствором NaCl, которым далее доводили объем суспензии клеток до объема крови, из которого они были выделеныа) 1,0 мл суспензии эритроцитов встряхивали 30 минут с равным объемом диэтилового эфира в пробирках с пришлифованными пробками на шуттель-аппарате.