Степени гемолиза

На основании этих опытов в дальнейших исследованиях сопоставляли биохимические параметры эритроцитов человека и кролика, как представителей видов клеток, относительно мало и высоко чувствительных к гемолитическому действию различия видовой чувствительности эритроцитов к гемолитическому действию окислителя были также подтверждены методами исследования кривых ОРЭ и мочевинного гемолиза. Для исследования использовали 33% взвеси эритроцитов человека и кролика в физиологическом растворе. Кривые ОРЭ определяли путем добавления 0,1 мл взвеси эритроцитов к 5 мл гипотонического раствора в рабочих концентрациях 0,30 70 -0,35% — 0,40%-0,45% -0,50% -0,55%. Самые низкие на компьютерные столы цены только у производителя в Бердянске.

Для определения мочевинного гемолиза использовали метод сущность которого заключается в том, что при помещении взвеси эритроцитов в смесь изотонических растворов мочевины и хлористого натрия происходит гемолиз части эритроцитов. Степень гемолиза пропорциональна концентрации мочевины и проницаемости мембран. Используя ряд стандартных разведений, можно получить кривую мочевинного гемолиза, отражающую изменения проницаемости популяции эритроцитов в разных условиях опыта. Для построения кривой мочевинного гемолиза (КМГ) использовали смеси следующих рабочих концентраций изотонических растворов мочевины (0,ЗМ) и NaCl (0 15М)-40:60, 45:55, 50:50, 55:45 и 60:40. Обычно в этих пределах укладываются начальная и конечная точки кривой гемолиза. Степень гемолиза оценивали на основании определения оптической плотности центрифугата (зеленый светофильтр) и рассчитывали в процентах. Эталонами сравнения служили гемолизат той же пробы крови в 5 мл изотонического раствора мочевины (100% гемолиз) и взвеси 0,1 мл пробы эритроцитов в 5 мл физиологического раствора (0% гемолиза). Сопоставление исходных величин резистентности (ОРЭ) и проницаемости (КМГ) взвесей эритроцитов человека и кролика что эритроциты человека.